8. Sempre revisar se o unmixing ficou correto

Após a realização do unmixing, é preciso verificar a presença de artefatos causados por erro neste processo. Uma maneira eficiente de fazer essa verificação é por meio de gráficos NxN, que mostram todas as combinações possíveis dos fluorocromos utilizados. Essa verificação pode ser feita utilizando a amostra multimarcada e também os controles simples marcados.

Os artefatos gerados pelo unmixing surgem, em geral, quando os controles simples marcados não estão adequados, promovendo imprecisões na identificação da assinatura espectral de cada fluorocromo, pelo algoritmo do unmixing. No exemplo da Colibri Cytometry, é possível observar que um unmixing realizado com células apresentou mais precisão em comparação ao realizado com beads (Figura 1).

Conte com a CYTO-flowing para revisar o seu unmixing e auxiliar na resolução de problemas.

Referências:

doi: 10.1002/cyto.a.24841