Não tenha medo de sua marcação não funcionar

Além de entupir o citômetro de fluxo, a marcação não funcionar é um medo frequênte por quem faz citometria de fluxo. Mas para evitar esse medo, é simples! Sempre valide suas marcações!

Planeje seu painel com atenção, verificando a compatibilidade entre os fluorocromos. Utilize células que você tenha certeza de que expressam os antígenos de interesse para realizar a titulação dos anticorpos. Assim, você determina a concentração ideal a ser utilizada para obter uma marcação otimizada.

Além disso, valide suas marcações com controles de marcação, como o FMO (Fluorescence Minus One), que já discutimos em postagens anteriores.

Seguindo essas etapas, você não precisará mais ter medo de que sua marcação não funcione na hora de analisar suas amostras.

Se você tiver certeza de que suas células expressam o antígeno, mas mesmo assim não está conseguindo marcá-lo, experimente outros clones do anticorpo e diferentes fluorocromos conjugados.

Além disso, conte com a CYTO-flowing para te ajudar!